潔凈實(shí)驗(yàn)室生物安全柜操作及使用方法

生物安全柜合理定期維護(hù)注意事項(xiàng)

合理定期的維護(hù)對維護(hù)任何設(shè)備的正常工作都是至關(guān)重要地，這一點(diǎn)對生物安全柜也不例外。按照下面推薦的維護(hù)日程表對安全柜進(jìn)行維護(hù)，保持其性能。為您介紹潔凈實(shí)驗(yàn)室生物安全柜操作及使用方法。

一．每日維護(hù)

1）用70%的酒精（其他殺菌劑視用戶使用的材料而定）*對安全柜內(nèi)部工作區(qū)域表面、側(cè)壁、后壁、窗戶進(jìn)行表面凈化。不要用含有氯的殺菌劑，因?yàn)樗赡軐Π踩竦牟讳P鋼結(jié)構(gòu)造成損壞。也要對紫外燈和電源輸出口表面進(jìn)行清潔。當(dāng)清潔安全柜內(nèi)部區(qū)域時(shí)，操作人員除了手放以外，身體的其他任何部位不能進(jìn)入安全柜。

2）檢查警報(bào)并檢測基本氣流

二．每周維護(hù)

1）用70%的酒精（其他殺菌劑視使用的材料而定）*對排水槽進(jìn)行清洗

2）檢查殘留物質(zhì)

三．每月維護(hù)

1）用濕布對安全柜外部表面進(jìn)行擦拭，尤其是安全柜的前面和上部，把堆積的灰塵打掃干凈。

2）檢查所有的維護(hù)配件的合理使用情況。

3）上述每日工作中的條目

四．每季維護(hù)

1）檢查安全柜的任何物理異?；蚬收稀z查熒光顯像管確保它們工作正常

2）當(dāng)不銹鋼上表面有難以去除的斑點(diǎn)時(shí)，可以使用MEK（methyl-ethyl-ketone）。使用WEK后，快速用清水和液體清潔劑沖洗不銹鋼板，并且用聚亞安酯布或者海綿進(jìn)行擦拭。定期清潔不銹鋼表面會(huì)使之保持表面的光滑美觀。

五．每年維護(hù)

1）具備資格的認(rèn)證技術(shù)人員對安全柜進(jìn)行性能認(rèn)證。

2）更換紫外燈

3）上述的每季維護(hù)

生物安全等級(jí)

生物安全等級(jí)P1

進(jìn)行試驗(yàn)研究用的物質(zhì)都是已知的,所有特性都已清楚并且已證明不會(huì)導(dǎo)致疾病的多種微生物物質(zhì)。研究通過日常的程序在公開的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面上進(jìn)行。不需要有特殊需求的安全保護(hù)措施。操作人員只需經(jīng)過基本的實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)程序培訓(xùn)并且通常由科研人員指導(dǎo)，在這樣的環(huán)境下并不需要生物安全柜的存在。

生物安全等級(jí)P2

進(jìn)行試驗(yàn)研究用的物質(zhì)是一些已知的中等程度危險(xiǎn)性的并且與人類某些常見疾病相關(guān)的物質(zhì)。操作者必須經(jīng)過進(jìn)行相關(guān)研究的操作培訓(xùn)并且由專業(yè)科研人員指導(dǎo)。對于易于污染的物質(zhì)或者可能產(chǎn)生污染的情況進(jìn)行預(yù)先的處理準(zhǔn)備。一些可能涉及或者產(chǎn)生有害生物物質(zhì)的操作過程都應(yīng)該在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，在這些條件下使用二級(jí)的生物安全柜。

生物安全等級(jí)P3

進(jìn)行試驗(yàn)研究的物質(zhì)一般都是本土或者外來的有通過呼吸傳染使人們致病或者有生命危險(xiǎn)的可能的物質(zhì)。我們需要保護(hù)一切在周圍環(huán)境中等操作者免于暴露于這些有潛在危險(xiǎn)的物質(zhì)中。通常使用二級(jí)或者三級(jí)的生物安全柜是必需的。

生物安全等級(jí)P4

進(jìn)行試驗(yàn)研究的物質(zhì)是一些非常高危險(xiǎn)性并且可以致命的有毒物質(zhì)，可以通過空氣傳播并且現(xiàn)今并沒有有效的疫苗或者治療方法來處理。操作者必須經(jīng)過熟練的關(guān)于進(jìn)行這種非常高危險(xiǎn)性物質(zhì)研究的培訓(xùn)，并且應(yīng)該很熟悉一些相關(guān)操作，保護(hù)設(shè)施，實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)等等方面對于這些高危險(xiǎn)性物質(zhì)的預(yù)防。同時(shí)也必須由在此研究領(lǐng)域非常有經(jīng)驗(yàn)的科研人員進(jìn)行指導(dǎo)。對于實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)出應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格的進(jìn)行控制，實(shí)驗(yàn)室一定要單獨(dú)的建造或者建造在一棟大樓中于其他任何地方都分離開的獨(dú)立房間內(nèi)，并且要求有詳細(xì)的關(guān)于研究的操作手冊進(jìn)行參考。在這樣的實(shí)驗(yàn)研究中三級(jí)的生物安全柜是必需的。

生物安全柜柜內(nèi)操作主要注意事項(xiàng)：

1、緩慢移動(dòng)原則：為了避免影響正常的風(fēng)路狀態(tài)，柜內(nèi)操作時(shí)手應(yīng)該盡量平緩移動(dòng)。

2、物品平行擺放原則：為了避免物品和物品之間的交叉污染現(xiàn)象產(chǎn)生，在柜內(nèi)擺放的物品應(yīng)該盡量呈橫向一字?jǐn)[開，避免回風(fēng)過程中造成交叉污染。同時(shí)避免堵塞背部回風(fēng)隔柵影響正常風(fēng)路。

3、避免震動(dòng)原則：柜內(nèi)盡量避免震動(dòng)儀器（例如離心機(jī)、旋渦振蕩器等）的使用，因?yàn)檎饎?dòng)會(huì)使得積留在濾膜上的顆粒物質(zhì)抖落，導(dǎo)致操作室內(nèi)部潔凈度降低，同時(shí)如果在前操作面平衡失敗還會(huì)引起安全柜對操作者的污染。

4、不同樣品柜內(nèi)移動(dòng)原則：柜內(nèi)兩種及以上物品需要移動(dòng)時(shí)，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移動(dòng)原則，避免污染性高的物品在移動(dòng)過程中產(chǎn)生對柜體內(nèi)部的大面積污染。

5、明火使用原則：柜內(nèi)盡量不要使用明火！因?yàn)樵诿骰鹗褂眠^程中產(chǎn)生的細(xì)小顆粒雜質(zhì)將被帶入濾膜區(qū)域，這些高溫雜質(zhì)會(huì)損傷濾膜。無法避免一定需要使用的時(shí)候，宜使用低火苗的本生燈。

生物安全柜操作及使用方法

1.生物安全柜的選擇

主要根據(jù)下列所需保護(hù)的類型來選擇適當(dāng)?shù)纳锇踩瘢簩?shí)驗(yàn)對象保護(hù)；操作危險(xiǎn)度1～4級(jí)微生物時(shí)的個(gè)體防護(hù)；暴露于放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)品時(shí)的個(gè)體防護(hù)；或上述各種防護(hù)的不同組合。表1列出了每一種防護(hù)類型所推薦使用的生物安全柜。

操作揮發(fā)性或有毒化學(xué)品時(shí)，不應(yīng)該使用將空氣重新循環(huán)排入房間的生物安全柜，即不與建筑物排風(fēng)系統(tǒng)相連接的Ⅰ級(jí)生物安全柜，或Ⅱ級(jí)A1型及Ⅱ級(jí)A2型生物安全柜。Ⅱ級(jí)B1型安全柜可用于操作少量揮發(fā)性化學(xué)品和放射性核素。Ⅱ級(jí)B2型安全柜也稱為全排放型安全柜，在需要操作大量放射性核素和揮發(fā)性化學(xué)品時(shí)，必須使用這一類型的安全柜。

2.實(shí)驗(yàn)室中生物安全柜的使用位置

空氣通過前面開口進(jìn)入生物安全柜的速度大約為0．45 m/s。這樣速度的定向氣流是極易受到干擾的，包括人員走近生物安全柜所形成的氣流、打開窗戶、送風(fēng)系統(tǒng)調(diào)整以及開關(guān)門等都可能造成影響。因此，zui為理想的是，生物安全柜應(yīng)位于遠(yuǎn)離人員活動(dòng)、物品流動(dòng)以及可能會(huì)擾亂氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個(gè)側(cè)面要盡可能留有30 cm的空間，以利于對安全柜的維護(hù)。在安全柜的上面應(yīng)留有30～35 cm的空間，以便準(zhǔn)確測量空氣通過排風(fēng)過濾器的速度，并便于排風(fēng)過濾器的更換。

3.操作者

生物安全柜如果使用不當(dāng)，其防護(hù)作用就可能大大受到影響。操作者在移動(dòng)雙臂進(jìn)出安全柜時(shí)，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應(yīng)該垂直地緩慢進(jìn)出前面的開口。手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過”手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進(jìn)行處理。要在開始實(shí)驗(yàn)之前將所有必需的物品置于安全柜內(nèi)，以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開口的次數(shù)。

3.物品放置

Ⅱ級(jí)生物安全柜前面的進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或其他物品阻擋。放入安全柜內(nèi)的物品應(yīng)采用70%酒精來清除表面污染?？梢栽谙緞┙竦拿砩线M(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以吸收可能濺出的液滴。所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺(tái)后部靠近工作臺(tái)后緣的位置，并使其在操作中不會(huì)阻擋后部格柵。可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備（例如混勻器、離心機(jī)等）應(yīng)靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品，應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。在工作臺(tái)面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行。

耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤不應(yīng)放在安全柜的外面，否則在使用這些物品時(shí)雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜，這樣會(huì)干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護(hù)。

安全柜內(nèi)的空氣可以通過HEPA過濾器按下列方式排出：（a）排到實(shí)驗(yàn)室中，然后再通過實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面；（b）通過建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)排到建筑物外面；（c）直接排到建筑物外面。HEPA過濾器可以裝在生物安全柜的壓力排風(fēng)系統(tǒng)（the exhaust plenum）里，也可以裝在建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)里。有些Ⅰ級(jí)生物安全柜裝有一體式排風(fēng)扇，而其他的則是借助建筑物排風(fēng)系統(tǒng)的排風(fēng)扇。

Ⅰ級(jí)生物安全柜是zui早得到認(rèn)可的，并且由于其設(shè)計(jì)簡單，目前仍在世界各地廣泛使用。Ⅰ級(jí)生物安全柜能夠?yàn)槿藛T和環(huán)境提供保護(hù)，也可用于操作放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)品。但因未滅菌的房間空氣通過生物安全柜正面的開口處直接吹到工作臺(tái)面上，因此Ⅰ級(jí)生物安全柜對操作對象不能提供切實(shí)可靠的保護(hù)。

Ⅱ級(jí)生物安全柜在應(yīng)用細(xì)胞和組織培養(yǎng)物來進(jìn)行病毒繁殖或其他培養(yǎng)時(shí)，未經(jīng)滅菌的房間空氣通過工作臺(tái)面是不符合要求的。Ⅱ級(jí)生物安全柜在設(shè)計(jì)上不但能提供個(gè)體防護(hù)，而且能保護(hù)工作臺(tái)面的物品不受房間空氣的污染。Ⅱ級(jí)生物安全柜有四種不同的類型（分別為A1、A2、B1和B2型），它們不同于Ⅰ級(jí)生物安全柜之處為，只讓經(jīng)HEPA過濾的（無菌的）空氣流過工作臺(tái)面。Ⅱ級(jí)生物安全柜可用于操作危險(xiǎn)度2級(jí)和3級(jí)的感染性物質(zhì)。在使用正壓防護(hù)服的條件下，Ⅱ級(jí)生物安全柜也可用于操作危險(xiǎn)度4級(jí)的感染性物質(zhì)。